BAB 2

BAB 2 : PENYEDIAAN LARUTAN STOK DAN MEDIUM PERTUMBUHAN

      MEDIUM PERTUMBUHAN

      Dapat membekalkan sumber makanan, nutrient yang penting untuk tumbuhan membiak di dalam botol.

KOMPONEN PENTING MEDIA

•   Makronutrie
• Mikro
• Vitamin
• Sukrosa
• Pengawal atur Tumbuhan atau hormon
• pH idea media
• Agen pepejal
• Arang teraktif

   1.      Makro

•   Nitrogen
•  Phosphorus 
• Poltasium
•   Kalium
• Magnesium
•   Sulfphur

  2.      Mikro

•    Ferum
•   Mangan
•    Zink
•   Boron
•  Copper
• Mollidenum 
• Kobolt

  3.      Vitamin
       o   Sebagai pemangkin dalam tindak balas enzim, kuantiti kecil
              Thiamine (vitamin B1)Asid nikotinikPiridoksina ( vitamin B6)Mio-inositol 

 

4.      Pengawal atur tumbuhan

 §  Auksin (akar)

• Memanjangkan sel dan membengkakkan tisu
• Membentuk kalus
•  Membentuk akar

§  Sitokinin

• Pembentukan pucuk dan tunas

 5.      Sumber karbon
       o   Keperluan sumber luar kerana kultur tisu tidak dapat karbohidrat secara fotosintesis       dengan sempurna
       o   Contoh sumber : Sucrose dan mallose

  6.      pH media
        o   pH ukuran keasidan dan kealkalian sesuatu larutan
        o   rendah daripada pH idea media : IN NaOH
        o   tinggi daripada pH idea media : IN HCL
 

  7.      Agen pepejal
        o   Mempengaruhi pertumbuhan kultur digunakan dalam medium pepejal
        o   Mengekalkan konsistensi media dan tidak dihadam dengan enzim
        o   Ia menggunakkan serbuk agar
 

  8.      Arang teraktif
        o   Keupayaan penyerapan yang menggalakkan pertumbuhan
        o   Menyerap sebatian toksik
        o   Medium pengakaran, tidak memerlukan hormon. Kos elektrik sebagai penambah.
        o   Nak atau tak nak letak pun tak apa agar-agar

 PENYEDIAAN MEDIUM MS    

     1.      Prosedur untuk 1 liter
     2.      Tambah 800 ml air suling ke dalam konokal flask berukuran 2l
     3.      Tambah larutan stok menggunakkan pipette dan kacau sehingga sebati
    4.      Tambah sukrosa dan kacau sehingga sebati
    5.      Semak nilai pH
    6.       Selaraskan pH pada (5.7 – 5.8)
    7.      Tambah 1 liter air suling
    8.      Tambah agar 7-8 gram per liter (agar tidak larut)
    9.      Tutup lubang konikal flask dengan dua lapisan aluminium foil dan letakkan pelekat      autoklaf yang    berlabel dikoniflas. Autoklaf selama 20minit dengan suhu 121°c 15 PSI
    10.  Sejukkan sehingga suhu 60°c
    11.  Secara aseptiknya guna pipette atau tuangkan larutan media yang suam ke dalam bekas kultur yang telah disterilkan. Gel akan terbentuk dalam masa 1 jam berikutnya
    12.  Media MS yang telah sejuk sepenuhnya diletakkan di dalam peti sejuk atau bilik inkubasi.